Roche 高效DNA地高辛標(biāo)記和檢測(cè)試劑盒I 產(chǎn)品介紹: 高效地高辛(DIG)標(biāo)記探針可應(yīng)用于RNA雜交,DNA雜交,點(diǎn)雜交分析等,同時(shí)也可用于克隆和噬菌斑雜交。試劑盒使用DIG-11-dUTP(堿不穩(wěn) 定性)隨機(jī)引物標(biāo)記DNA模板并對(duì)DIG標(biāo)記雜交物進(jìn)行顯色檢測(cè)。試劑盒備有結(jié)合儲(chǔ)存液NBT/ BCIP,現(xiàn)有的封閉液和DIG易雜交顆粒。高效DIG混合物包含穩(wěn)定Klenow enzyme(克列諾酶),核苷酸,引物和反應(yīng)緩沖液。 Roche 高效DNA地高辛標(biāo)記和檢測(cè)試劑盒I 檢測(cè)原理: 高效DNA地高辛標(biāo)記檢測(cè)試劑盒I是用地高辛(Digoxigenin,簡(jiǎn)稱DIG;又稱異羥基洋地黃毒甙元,是一種類固醇半抗原分子)標(biāo)記的DNA探針,應(yīng)用于分子雜交和隨后的顯色反應(yīng)檢測(cè)。羅氏公司的該試劑盒檢測(cè)主要分三階段進(jìn)行:1)DNA標(biāo)記:根據(jù)隨機(jī)引物標(biāo)記技術(shù),生成DIG地高辛標(biāo)記的DNA探針。2)雜交:按照標(biāo)準(zhǔn)雜交方法進(jìn)行,將地高辛標(biāo)記的DNA探針用于核酸點(diǎn)雜交,可選擇帶正電的尼龍膜或純硝酸纖維素膜作為雜交膜。 3)免疫學(xué)檢測(cè):首先將標(biāo)記有AP的地高辛抗體與雜交探針免疫結(jié)合;通過(guò)檢測(cè)堿性磷酸酶與NBT/BCIP底物進(jìn)行顯色反應(yīng)的數(shù)值,從而達(dá)到免疫檢測(cè)的目的。 靈敏度和特異性:標(biāo)準(zhǔn)檢測(cè)使用1µg線狀pBR328。通常需要0.8µg標(biāo)記DNA(標(biāo)記1小時(shí)后)和 2.3µg標(biāo)記DNA(20小時(shí)反應(yīng)后)。在點(diǎn)雜交過(guò)程中,16小時(shí)顯色后(探針濃度20ng/ml)可以檢測(cè)到0.1pg同源DNA。DNA印跡中,加 載1µg消化胎盤DNA可檢測(cè)到單拷貝基因(tPA)。 地高辛引物標(biāo)記優(yōu)點(diǎn):質(zhì)粒、柯斯質(zhì)粒和λ噬菌體DNA均可作為模板,模板DNA(線狀或超螺旋)標(biāo)記10ng-3µg引物都具有同樣的標(biāo)記效率。 產(chǎn)品組成成份: ? DIG-High Prime, 5x conc., 50 µl ? DIG-labeled Control DNA, 20 µl, (5 µg/ml) pBR328 (linearized with Bam HI) ? DNA Dilution Buffer, 3 x 1 ml ? Anti-digoxigenin-AP Conjugate, 100 µl ? NBT/BCIP Stock Solution, conc., 6 x 1 ml ? Blocking Solution, 10x conc., 4 x 100 ml ? DIG Easy Hyb Granules, 4 x 100 ml
Roche作為zui大的生物技術(shù)公司,羅氏在抗腫瘤、抗病毒、炎癥、代謝和中樞神經(jīng)系統(tǒng)等領(lǐng)域擁有*的差異化藥物。羅氏在體外診斷和基于組 織的腫瘤診斷市場(chǎng)中享有,同時(shí)也是糖尿病管理領(lǐng)域的者。Roche公司生產(chǎn)的DIG標(biāo)記DNA檢測(cè)試劑盒在DNA、RNA和核酸點(diǎn)雜交等實(shí)驗(yàn) 應(yīng)用中有出色表現(xiàn),特別是第二代試劑盒使用CSPD化學(xué)發(fā)光檢測(cè)具有更高的準(zhǔn)確度和靈敏性。
重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司
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