MTT法和CCK-8法細胞活性檢測及CCK-8試劑盒*

MTT法細胞活性檢測方法簡介

MTT法------什么是MTT法?

MTT法又稱MTT比色法，是一種檢測細胞存活和生長的方法。其檢測原理為活細胞線粒體中的琥珀酸脫氫酶能使外源性MTT還原為水不溶性的藍紫色結(jié)晶甲瓚（Formazan）并沉積在細胞中，而死細胞無此功能。二甲基亞砜（DMSO）能溶解細胞中的甲瓚，用酶聯(lián)免疫檢測儀在490nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數(shù)量。在一定細胞數(shù)范圍內(nèi)，MTT結(jié)晶形成的量與細胞數(shù)成正比。MTT法已廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、細胞增殖測定、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞毒性試驗以及腫瘤放射敏感性測定等。MTT法的特點是靈敏度高、價格經(jīng)濟實惠。不過，MTT法是有缺陷的，是因為MTT經(jīng)還原所產(chǎn)生的甲瓚產(chǎn)物不溶于水，需被溶解后才能檢測。這不僅使檢測時的工作量增加，也會對實驗結(jié)果的準確性產(chǎn)生影響，而且溶解甲瓚的有機溶劑對實驗者也有損害。

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CCK-8法(或稱WST-8法)細胞活性檢測方法簡介

CCK-8細胞活性檢測試劑中含有WST-8，化學名：2-(2-甲氧基-4-硝基苯基)-3-(4-硝基苯基)-5-(2,4-二磺酸苯)-2H-四唑單鈉鹽]，它在電子載體1-甲氧基-5-甲基吩嗪鎓*（1-Methoxy PMS）的作用下被細胞線粒體中的脫氫酶還原為具有高度水溶性的黃色甲瓚產(chǎn)物（Formazan）。生成的甲瓚物的數(shù)量與活細胞的數(shù)量成正比。用酶聯(lián)免疫檢測儀在450nm波長處測定其光吸收值，可間接反映活細胞數(shù)量。該方法已被廣泛用于一些生物活性因子的活性檢測、大規(guī)模的抗腫瘤藥物篩選、細胞增殖試驗、細胞毒性試驗以及藥敏試驗等。CCK-8法的優(yōu)點： 1、使用方便，省去了洗滌細胞，不需要放射性同位素和有機溶劑； 2、CCK-8法能快速檢測； 3、CCK-8法的檢測靈敏度很高，甚至可以測定較低細胞密度； 4、CCK-8法的重復性優(yōu)于MTT法； 5、CCK-8法對細胞毒性??； 6、CCK-8細胞活性檢測試劑中為1瓶溶液，毋需預制，即開即用。  CCK-8法的缺點: 1、與MTT法相比，CCK-8和XTT的價格比較貴。 2、CCK-8試劑的顏色為淡紅色，與含酚紅的培養(yǎng)基顏色接近，不注意的話容易產(chǎn)生漏加或多加。

CCK-8法和MTT法比較研究的文獻參考

請點擊查看>>> CCK-8法和MTT法檢測人前列腺癌PC3細胞活性的*條件比較研究

參考文獻摘要：以人前列腺癌PC3細胞作為研究對象，探討了CCK-8法和MTT法的*實驗條件。CCK-8的*檢測波長為450 nm，*檢測時間為加入CCK-8試劑后4 h，適宜細胞數(shù)量范圍為8×102-1×105個。在檢測抗腫瘤藥物阿霉素(ADM)對PC3細胞的增殖影響實驗中，發(fā)現(xiàn)CCK-8法測得數(shù)據(jù)的線性相關(guān)性優(yōu)于MTT法，并且數(shù)據(jù)偏差較MTT法小。實驗結(jié)果表明CCK-8法較MTT法檢測的靈敏度高，準確性好，是一種優(yōu)于MTT法的檢測細胞增殖活性的方法。

請點擊查看>>> MTT法和CCK-8法檢測細胞活性之測試條件比較

參考文獻摘要：利用HL60作為研究對象，對比了MTT法和CCK-8法在*檢測時刻和檢測波長等參數(shù)的差異。對于CCK-8法，*測試時刻在細胞液培養(yǎng)4 h后，*測試波長為490 nm。實驗結(jié)果表明用CCK-8法檢測的OD值與活細胞數(shù)的線性相關(guān)度要優(yōu)于MTT法，是一種靈敏度較高、重復性好的的細胞活性檢測方法。

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CCK-8法和MTT法的區(qū)別

Cell Counting Kit-8（CCK-8試劑盒）產(chǎn)品訂購信息

   品牌               貨號                     產(chǎn)品名稱                      包裝規(guī)格          *格         貨期
DOJINDO      CK04-500        Cell Counting Kit-8 試劑盒        500 Tests          998元           現(xiàn)貨
DOJINDO      CK04-1000      Cell Counting Kit-8 試劑盒       1000 Tests         1668元          現(xiàn)貨
DOJINDO      CK04-3000      Cell Counting Kit-8 試劑盒       3000 Tests          請詢價          現(xiàn)貨

上海華雅思創(chuàng)生物銷售的Cell Counting Kit-8（CCK-8試劑盒）是從日本進口的，由日本Dojindo開發(fā)的檢測細胞增殖、細胞毒性的試劑盒，為MTT法的替代方法，試劑盒中采用Dojindo開發(fā)的水溶性四唑鹽-WST-8，在日本、美國、歐洲等國家均持有和注冊商標。上海華雅思創(chuàng)生物科技有限公司在上海倉庫備有現(xiàn)貨，并嚴格按照產(chǎn)品的*儲存條件進行儲存與管理，我們的一貫宗旨是：更用心地為中國廣大科學研究工作者提供更安全、更放心、更便捷的服務(wù)。

CCK-8試劑盒圖片

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CCK-8試劑盒的主要產(chǎn)品特性及應用

★ 操作簡便，省時省力
★ 水溶性，不需要換液，尤其適合于懸浮細胞
★ 無需放射性同位素和有機溶劑，對細胞毒性低
★ 為1瓶溶液，毋需預制，即開即用
★ 適合于高通量藥物篩選

CCK-8的用途：藥物篩選、細胞增殖測定、細胞毒性測定、腫瘤藥敏試驗
CCK-8的使用：CCK-8試劑盒在中國中科院、北京大學、復旦大學、中山大學、四川大學、武漢大學等科研院所、*醫(yī)院的中心實驗室廣泛應用，受到科研者的高度評價，使用CCK-8發(fā)表的文獻達600多篇，其中截止2008年底SCI影響因子IF＞10分的論文有37篇，zui高IF26.5分。

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