高通量測(cè)序文庫(kù)DNA/RNA純化及片段篩選磁珠產(chǎn)品特征 專(zhuān)為DNA和RNA純化而設(shè)計(jì) 適用于NGS的核酸片段篩選 有效去除dNTPs,引物,引物二聚體和其他雜質(zhì) 不需要離心或過(guò)濾 重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 , : 名詞解釋?zhuān)?/span> NGS:高通量測(cè)序(High-Throughput Sequencing)又名下一代測(cè)序(Next Generation Sequencing,NGS),是相對(duì)于傳統(tǒng)的桑格測(cè)序(Sanger Sequencing)而言的。 CleanNGS核酸純化磁珠與AMPureXP操作規(guī)程和結(jié)果無(wú)明顯差異,但價(jià)格更低。 CleanNGS磁珠可以通過(guò)調(diào)節(jié)磁珠和核酸樣本體積比,輕松進(jìn)行核酸片段篩選。 CleanNGS核酸純化磁珠優(yōu)勢(shì): 1. 優(yōu)異的緩沖體系,100bp以上擴(kuò)增產(chǎn)物回收效率更高; 2. 有效去除dNTP、引物、引物二聚體、鹽離子和其他雜質(zhì); 3. 可進(jìn)行核酸大小篩選。 3. 磁珠磁含量更高,磁吸附時(shí)間更短; 4. 無(wú)RNA酶的生產(chǎn)過(guò)程確保能應(yīng)用于各種RNA的純化操作; 5. 可配套自動(dòng)化設(shè)備進(jìn)行高通量產(chǎn)物純化。 6. 與AMPureXP操作規(guī)程和結(jié)果無(wú)明顯差異,但價(jià)格更低。 CleanNGS核酸純化磁珠試劑盒使用羧化磁珠純化DNA、RNA,為新一代測(cè)序(NGS)流程提供了高效的純化系統(tǒng)。 CleanNGS試劑盒具有zui大的靈活性,只要調(diào)節(jié)樣品和CleanNGS磁珠的體積比,可以輕松進(jìn)行核酸左側(cè),右側(cè)或雙側(cè)大小篩選。 CleanNGS使DNA和/或RNA核酸片段根據(jù)其大小選擇性地結(jié)合到磁珠上,同時(shí)根據(jù)化學(xué)性質(zhì)去除鹽,引物,引物二聚體和dNTP。純化的DNA和RNA使用水或低鹽緩沖液洗脫磁珠,并且可以直接用于下游應(yīng)用等。CleanNGS可以手動(dòng)使用,也可以適用于您當(dāng)前的液體處理工作站所用方法(例如Hamilton,Beckman,Agilent,Caliper,Perkin Elmer,Tecan和Eppendorf)。 應(yīng)用: CleanNGS系統(tǒng)純化的產(chǎn)物是用水洗脫的,可立即用于下游應(yīng)用: 新一代測(cè)序、PCR 基因組DNA純化、RNA純化 片段分析、微陣列、限制性酶純化、克隆 CleanNGS DNA/RNA純化磁珠可配套的液體工作站: Beckman FX, Beckman NX ,Hamilton Microlab Star,Hamilton StarLET,Xiril Neon Instruments,Caliper Sciclone,Thermo KingFisher BioSprint (Qiagen) Ambion MagMax 96,Perkin Elmer Janus,Agilent Bravo等。 工作原理: 羧化磁珠 CleanNGS采用羧化磁珠,可以特異性結(jié)合核酸,非特異性洗脫。相比硅基磁珠,非特異性結(jié)合更少,產(chǎn)量更高,更具有專(zhuān)有性。 試劑盒組份 CleanNGS羧基化磁珠,含于PCR結(jié)合緩沖液中 使用自備材料 •乙醇 •CleanNA環(huán)形磁鐵板 •用于DNA洗脫的TE或試劑級(jí)水 高通量測(cè)序文庫(kù)DNA/RNA純化及片段篩選磁珠 是歐洲CleanNA產(chǎn)品,可1比1替代MPureXP磁珠。 重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 , : 操作流程: PCR產(chǎn)物純化流程(上圖) 1 添加CleanNGS和Mix以將NGS文庫(kù)片段或PCR產(chǎn)物結(jié)合到磁珠上。 2 將磁珠磁化以將樣品與雜質(zhì)分離。吸出含雜質(zhì)溶液。 3 加入70%乙醇清洗磁珠。磁珠磁化。吸出乙醇。重復(fù)步驟。 4 加入水從磁珠上洗脫DNA。磁珠磁化并提取純化的PCR產(chǎn)物。 核酸片段篩選流程(上圖) 1.添加*份CleanNGS到文庫(kù)中以結(jié)合大片段 2.用磁鐵將磁珠從溶液中分離出來(lái) 3.將含有較小片段的上清液轉(zhuǎn)移到干凈的微孔中 4.添加第二份CleanNGS到上清液中以結(jié)合目標(biāo)大小片段 5.用磁鐵將磁珠從溶液中分離出來(lái),吸出并丟棄含雜質(zhì)的上清液 6.用80%乙醇清洗珠子 7.加入水以從珠上洗脫DNA。使用磁鐵分離磁珠,并提取純化和經(jīng)過(guò)大小篩選的DNA核酸片段。 核酸片段篩選舉例:0.8x / 0.7x(左/右)片段篩選,樣品量50μL •*步: 添加0.7 x 50μL= 35μLCleanNGS 將大片段結(jié)合到磁珠上 結(jié)合和分離后轉(zhuǎn)移上清液 •第二步: 將(0.8-0.7)x 50μL= 5μL CleanNGS加入上清液 將感興趣的片段結(jié)合到新一組的磁珠上 吸出并棄上清液(含有zui小的片段) 清洗并洗脫經(jīng)片段篩選的DNA *步: 添加0.7 x 50μL= 35μLCleanNGS 將大片段結(jié)合到磁珠上 結(jié)合和分離后轉(zhuǎn)移上清液 第二步: 將(0.8-0.7)x 50μL= 5μL CleanNGS加入上清液 將感興趣的片段結(jié)合到新一組的磁珠上 吸出并棄上清液(含有zui小的片段) 清洗并洗脫經(jīng)大小片段篩選的DNA 訂購(gòu)信息: 品牌 | 貨號(hào) | 產(chǎn)品描述 | 規(guī)格(反應(yīng)次數(shù))* | CleanNA | CNGS-0005 | CleanNGS(5 mL) | 277 | CleanNA | CNGS-0050 | CleanNGS(50 mL) | 2,777 | CleanNA | CNGS-0500 | CleanNGS(500 mL) | 27,777 |
*基于10 µl PCR反應(yīng)量
重慶市華雅干細(xì)胞技術(shù)有限公司 , : |